幻灯片 1检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质 实验目的: 实验原理: 实验步骤: 实验专题2 注意事项: 应用: ---- 幻灯片 2①什么是还原性糖?常见的有哪些? ②实验原理是什么? ③如何选择实验材料? ④斐林试剂 ⑤组织样液加入斐林试剂后颜色如何变化?结果 一、可溶性还原糖的鉴定 ---- 幻灯片 31、还原糖:分子内含有游离的具还原性的半缩醛羟基 原理: 葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖 -CHO+Cu(OH)2 -COOH+Cu2O↓砖红色 ---- 幻灯片 42、斐林试剂: 甲液:(0.1g/ml NaOH 溶液)和 乙液: (0.05g/ml CuSO4 溶液) 分别配制、储存,使用时临时混合均匀 班氏试剂: CuSO4的柠檬酸钠和碳酸钠溶液,稳定。 ---- 幻灯片 53、如何选择实验材料? 选择含还原糖多且颜色浅或接近白色的植物组织。 因为颜色过深的植物组织中的色素对颜色反应起掩盖作用。 ---- 幻灯片 64、苹果组织样液加入斐林试剂后颜色如何变化? 结果:蓝---------棕---------砖红 ---- 幻灯片 71.制备生物组织样液 (1)苹果切块-----(2) 研磨------(3) 过滤。 实验步骤: 2.实验操作方法和观察 (1)取1支试管,向试管内注入2 mL苹果组织样液。 (2)向试管内注入2 mL刚配制的斐林试剂。 (注意:必须将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后使用,切勿分别加入生物组织样液中进行检测。)振荡试管,使溶液混合均匀,此时溶液呈蓝色。 (3)将这支试管放进盛有开水的大烧杯中,用酒精灯加热煮沸2 min(分)左右。在对试管加热煮沸的过程中,随时仔细观察试管中溶液的颜色发生了什么变化。 结果:蓝-----棕----砖红 ---- 幻灯片 8①实验原理是什么? ②在制作临时装片的过程中用什么试剂洗去浮色? ③显微镜下观察到什么? 二、脂肪的鉴定 ---- 幻灯片 9①实验原理 苏丹Ⅲ(苏丹Ⅳ)为一种脂肪染色剂 (易溶解于酒精,不溶解于水)。 苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色, 苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。 ---- 幻灯片 10②在制作临时装片的过程中用什么试剂洗去浮色? 50%的酒精 ③显微镜下观察到什么? 有被染成橘黄色的脂肪微粒 ---- 幻灯片 11---- 幻灯片 121.制备生物组织实验材料 (1)取一粒浸泡过的花生种子(浸泡时间不宜过长,以免影响切成薄片),去掉种皮。 (2)用左手的三个手指夹住花生一片子叶,使花生子叶高于手指之上(以免刀口切伤手指)。右手持刀片,将子叶削去一层,形成平面。 (3)刀口向内,与花生断面平行,以均匀的动作,自左前方向右后方快速拉刀,滑行切片(注意要整个臂部用力,而不要腕部用力。如此连续动作,切下一些薄片。然后,用毛笔将最薄的几片材料移至洁净的载玻片中央。 ---- 幻灯片 132.实验操作方法和观察 (1)用滴管在花生子叶薄片上滴2—3滴苏丹 Ш染液,染色2~3 min。 (2)用吸水纸吸去花生子叶薄片周围的染液,在薄片上滴1~2滴体积分数为50%的酒精溶液,洗去浮色。 (3)用吸水纸吸去花生子叶薄片周围的酒精,在薄片上滴1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片。 ---- 幻灯片 14三、蛋白质的鉴定 双缩脲试剂: A液(0.1g/mlNaOH溶液)和 B液 (0.01g/mlCuSO4溶液) 先加A液,造成碱性环境,再加试剂B;切勿混合 加双缩脲试剂A后,溶液仍透明无色; 加入B液振荡均匀后,变紫色。 ---- 幻灯片 15---- 幻灯片 16使用蛋清作实验材料,为什么要先稀释? 如果不稀释,反应后产生的化合物会粘附在 试管壁 ,导致反应不彻底,而且难以清洗 ---- 幻灯片 17可溶性还原糖 + 蛋白质 + 脂肪 + 砖红色沉淀 橘黄色 红色 紫色 颜色反应 原理 总结: ---- 幻灯片 18斐林 试剂 双缩脲 试剂 斐林试剂与双缩脲试剂的比较 用于鉴定可溶性还原糖时需水浴煮沸 用于鉴定蛋白质时不需水浴煮沸 ---- 幻灯片 19对照原则 有比较才有鉴别,对照是实验控制的手段之一, 通过设置对照实验,可以消除无关因子对结果的影响, 证明实验的客观性,具有说服力和可信度。 单一变量原则 控制其他因素不变,而只改变其中某一因素, 观察该变量对实验材料和实验结果的影响。 ---- 幻灯片 201.生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的 鉴定实验中,以下操作错误的是( ) A.可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产 生砖红色沉淀 B.只有脂肪的鉴定需要使用显微镜 C.用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热 D.使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用 练习 A ---- 幻灯片 212.班氏试剂是一种能与可溶性还原糖发生 颜色反应的试剂,在医院常用。现有一瓶配制好 的班氏试剂,你认为可能用它鉴定哪一种疾病(  ) A.白血病 B.感冒发烧 C.糖尿病 D.甲亢 C ---- 幻灯片 223.鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品, 不需要用的化学试剂是( ) A.斐林试剂 B.苏丹Ⅳ染液 C.双缩脲试剂 D.红墨水 解析: 普通奶粉:主要含有蛋白质、脂肪、糖类。 脱脂淡奶粉:因脱去脂,所以无脂肪; 因是淡奶粉,所以无糖; 主要成分只剩下蛋白质。 红墨水是用来观察水分的运输作用的。 D ---- 幻灯片 234. 下列哪组试剂在使用过程中,必须经过加热( ) A.斐林试剂鉴定还原糖的过程中 B.苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ染液在鉴定动物组织中的脂肪时 C.双缩脲试剂鉴定蛋白质时 D.碘化钾溶液鉴定淀粉时 5. 用苏丹Ⅲ染液对脂肪组织进行染色时,可用来 冲洗浮色的药品是(   ) A.吸水纸 B.H2O C.50%的酒精 D.无水酒精 6. 下列哪个实验用到显微镜( ) A.还原糖的鉴定 B.蛋白质的鉴定 C.脂肪的鉴定 D.淀粉的鉴定 A C C ---- 幻灯片 247.对斐林试剂和双缩脲试剂的配方,叙述不正确的是 (  ) A. 都含有NaOH溶液和CuSO4溶液 B. 斐林试剂的配制是将4-5滴0.05g/ml的CuSO4 溶液滴入2ml 0.1g/ml的 NaOH溶液中即成 C. 双缩脲试剂是将3-4滴0.01g/ml的CuSO4溶液 滴入2ml0.1g/ml的 NaOH溶液中混合而成的 D. 双缩脲试剂含有两种试剂:质量浓度为0.1g/ml的 NaOH溶液和质量浓度为0.O1g/ml的CuSO4溶液 C ---- 幻灯片 258.将面团包在纱布中在清水中搓洗,鉴定黏留在 纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是(   ) A.碘液、苏丹Ⅲ溶液 B.双缩脲试剂、碘液 C.亚甲基蓝溶液、苏丹Ⅲ D.碘液、斐林试剂 B ----

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