幻灯片 1检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质
实验目的:
实验原理:
实验步骤:
实验专题2
注意事项:
应用:
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幻灯片 2①什么是还原性糖?常见的有哪些?
②实验原理是什么?
③如何选择实验材料?
④斐林试剂
⑤组织样液加入斐林试剂后颜色如何变化?结果
一、可溶性还原糖的鉴定
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幻灯片 31、还原糖:分子内含有游离的具还原性的半缩醛羟基
原理:
葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖
-CHO+Cu(OH)2
-COOH+Cu2O↓砖红色
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幻灯片 42、斐林试剂:
甲液:(0.1g/ml NaOH 溶液)和
乙液: (0.05g/ml CuSO4 溶液)
分别配制、储存,使用时临时混合均匀
班氏试剂:
CuSO4的柠檬酸钠和碳酸钠溶液,稳定。
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幻灯片 53、如何选择实验材料?
选择含还原糖多且颜色浅或接近白色的植物组织。
因为颜色过深的植物组织中的色素对颜色反应起掩盖作用。
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幻灯片 64、苹果组织样液加入斐林试剂后颜色如何变化?
结果:蓝---------棕---------砖红
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幻灯片 71.制备生物组织样液
(1)苹果切块-----(2) 研磨------(3) 过滤。
实验步骤:
2.实验操作方法和观察(1)取1支试管,向试管内注入2 mL苹果组织样液。
(2)向试管内注入2 mL刚配制的斐林试剂。
(注意:必须将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后使用,切勿分别加入生物组织样液中进行检测。)振荡试管,使溶液混合均匀,此时溶液呈蓝色。
(3)将这支试管放进盛有开水的大烧杯中,用酒精灯加热煮沸2 min(分)左右。在对试管加热煮沸的过程中,随时仔细观察试管中溶液的颜色发生了什么变化。
结果:蓝-----棕----砖红
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幻灯片 8①实验原理是什么?
②在制作临时装片的过程中用什么试剂洗去浮色?
③显微镜下观察到什么?
二、脂肪的鉴定
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幻灯片 9①实验原理
苏丹Ⅲ(苏丹Ⅳ)为一种脂肪染色剂
(易溶解于酒精,不溶解于水)。
苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色,
苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。
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幻灯片 10②在制作临时装片的过程中用什么试剂洗去浮色?
50%的酒精
③显微镜下观察到什么?
有被染成橘黄色的脂肪微粒
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幻灯片 11----
幻灯片 121.制备生物组织实验材料
(1)取一粒浸泡过的花生种子(浸泡时间不宜过长,以免影响切成薄片),去掉种皮。
(2)用左手的三个手指夹住花生一片子叶,使花生子叶高于手指之上(以免刀口切伤手指)。右手持刀片,将子叶削去一层,形成平面。
(3)刀口向内,与花生断面平行,以均匀的动作,自左前方向右后方快速拉刀,滑行切片(注意要整个臂部用力,而不要腕部用力。如此连续动作,切下一些薄片。然后,用毛笔将最薄的几片材料移至洁净的载玻片中央。
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幻灯片 132.实验操作方法和观察
(1)用滴管在花生子叶薄片上滴2—3滴苏丹 Ш染液,染色2~3 min。
(2)用吸水纸吸去花生子叶薄片周围的染液,在薄片上滴1~2滴体积分数为50%的酒精溶液,洗去浮色。
(3)用吸水纸吸去花生子叶薄片周围的酒精,在薄片上滴1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片。
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幻灯片 14三、蛋白质的鉴定
双缩脲试剂:
A液(0.1g/mlNaOH溶液)和
B液 (0.01g/mlCuSO4溶液)
先加A液,造成碱性环境,再加试剂B;切勿混合
加双缩脲试剂A后,溶液仍透明无色;
加入B液振荡均匀后,变紫色。
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幻灯片 15----
幻灯片 16使用蛋清作实验材料,为什么要先稀释?
如果不稀释,反应后产生的化合物会粘附在
试管壁 ,导致反应不彻底,而且难以清洗
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幻灯片 17可溶性还原糖 +
蛋白质 +
脂肪 +
砖红色沉淀
橘黄色
红色
紫色
颜色反应
原理
总结:
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幻灯片 18斐林
试剂
双缩脲
试剂
斐林试剂与双缩脲试剂的比较
用于鉴定可溶性还原糖时需水浴煮沸
用于鉴定蛋白质时不需水浴煮沸
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幻灯片 19对照原则
有比较才有鉴别,对照是实验控制的手段之一,
通过设置对照实验,可以消除无关因子对结果的影响,
证明实验的客观性,具有说服力和可信度。
单一变量原则
控制其他因素不变,而只改变其中某一因素,
观察该变量对实验材料和实验结果的影响。
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幻灯片 201.生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的
鉴定实验中,以下操作错误的是( )
A.可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产
生砖红色沉淀
B.只有脂肪的鉴定需要使用显微镜
C.用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热
D.使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用
练习
A
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幻灯片 212.班氏试剂是一种能与可溶性还原糖发生
颜色反应的试剂,在医院常用。现有一瓶配制好
的班氏试剂,你认为可能用它鉴定哪一种疾病( )
A.白血病
B.感冒发烧
C.糖尿病
D.甲亢
C
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幻灯片 223.鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,
不需要用的化学试剂是( )
A.斐林试剂 B.苏丹Ⅳ染液 C.双缩脲试剂 D.红墨水
解析:
普通奶粉:主要含有蛋白质、脂肪、糖类。
脱脂淡奶粉:因脱去脂,所以无脂肪;
因是淡奶粉,所以无糖;
主要成分只剩下蛋白质。
红墨水是用来观察水分的运输作用的。
D
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幻灯片 234. 下列哪组试剂在使用过程中,必须经过加热( )
A.斐林试剂鉴定还原糖的过程中
B.苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ染液在鉴定动物组织中的脂肪时
C.双缩脲试剂鉴定蛋白质时
D.碘化钾溶液鉴定淀粉时
5. 用苏丹Ⅲ染液对脂肪组织进行染色时,可用来
冲洗浮色的药品是( ) A.吸水纸 B.H2O C.50%的酒精 D.无水酒精
6. 下列哪个实验用到显微镜( )
A.还原糖的鉴定 B.蛋白质的鉴定
C.脂肪的鉴定 D.淀粉的鉴定
A
C
C
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幻灯片 247.对斐林试剂和双缩脲试剂的配方,叙述不正确的是
( )
A. 都含有NaOH溶液和CuSO4溶液
B. 斐林试剂的配制是将4-5滴0.05g/ml的CuSO4
溶液滴入2ml 0.1g/ml的 NaOH溶液中即成
C. 双缩脲试剂是将3-4滴0.01g/ml的CuSO4溶液
滴入2ml0.1g/ml的 NaOH溶液中混合而成的
D. 双缩脲试剂含有两种试剂:质量浓度为0.1g/ml的
NaOH溶液和质量浓度为0.O1g/ml的CuSO4溶液
C
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幻灯片 258.将面团包在纱布中在清水中搓洗,鉴定黏留在
纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是( )
A.碘液、苏丹Ⅲ溶液
B.双缩脲试剂、碘液
C.亚甲基蓝溶液、苏丹Ⅲ
D.碘液、斐林试剂
B
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