1.电泳实现样品中各种分子的分离是利用了( )
A.各种分子带电性质的差异
B.分子本身的大小不同
C.分子形状的不同
D.以上都正确
解析:选D。许多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团会带上正电或负电。在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。
2.电泳过程中,什么样的分子迁移速度最快( )
A.纤维状、大分子 B.纤维状、小分子
C.球状、大分子 D.球状、小分子
解析:选D。电泳就是利用了连续分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同。一般来说,球形分子比纤维状分子易移动,小分子比大分子易移动。
3.(2012·西工大附中高二检测)关于“血清蛋白的提取和分离”的活动顺序正确的是( )
①染色 ②电泳 ③点样 ④脱色 ⑤制干胶板
A.①②③⑤④ B.⑤②①③④
C.④①②③⑤ D.③②①④⑤
解析:选D。血清蛋白的提取和分离的过程,第一步是用微量加样器吸取样品加到电泳样品槽的胶面上,即点样。第二步是打开电泳仪的电源,进行电泳。第三步是用考马斯亮蓝R250染液进行染色。第四步是用醋酸溶液脱色。第五步是将已脱色的凝胶板浸泡后,自然干燥即获得血清蛋白的电泳带。
4.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中决定蛋白质或多肽移动速度的主要因素是( )
A.蛋白质分子所带的电荷
B.蛋白质分子的形状
C.蛋白质分子的相对分子质量
D.缓冲溶液的pH
解析:选C。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成单条肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白质—SDS复合物,SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异,从而达到仅根据蛋白质相对分子质量的不同来分离蛋白质的目的。
5.如图为某些氨基酸在pH=6时进行电泳的结果,请回答:
(1)由图示可知,pH=6时带正电荷的氨基酸是________,带负电荷的氨基酸是________________。请说明理由_______________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)假设谷氨酸和赖氨酸所带电荷数相同,它们到达两极的速度一样吗?________,为什么?________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)若把氨基酸换成蛋白质,会出现什么现象?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
解析:氨基酸是一种两性电解质,在一定pH条件下带电荷,作为带电粒子,氨基酸向与其自身所带电荷相反的电极运动,即向正极运动的氨基酸带负电荷,向负极运动的氨基酸带正电荷,在原点不动的氨基酸,所带正电荷和负电荷相等。蛋白质也是一种两性电解质。
答案:(1)赖氨酸 谷氨酸 氨基酸是一种两性电解质,在一定pH条件下带电荷,作为带电粒子,在进行电泳时氨基酸向与其自身所带电荷相反的电极方向运动[高考资源网KS5U.COM]
(2)不一样 进行电泳时,若氨基酸带相同的电荷数,相对分子质量越小,则移动越快。由于两者相对分子质量不相等,因此到达两极的速度不同
(3)蛋白质同氨基酸一样,在一定pH条件下带电荷,也会向与其自身所带电荷相反的电极方向运动
1.蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述不正确的是( )
A.根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性,可将样品中各种不同的蛋白质分离
B.根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等,可通过电泳分离蛋白质
C.根据蛋白质相对分子质量的大小,可通过层析技术分离蛋白质
D.根据蛋白质的分子大小、密度不同,可通过离心技术分离蛋白质
解析:选A。蛋白质分子不能透过半透膜,据此可利用半透膜除去样品中相对分子质量小的杂质。
2.下列叙述不正确的是( )
A.蛋白质所带的电荷数越多,移动得越快
B.蛋白质所带的电荷数越少,移动得越快
C.电荷数相同时,相对分子质量越大,移动越慢
D.电荷数相同时,相对分子质量越小,移动越快
解析:选B。在电泳中,蛋白质所带的电荷数越多,移动越快,电荷数相同时,相对分子质量越小,则移动越快。[高考资源网]
3.某蛋白质等电点为7.5,在pH为6.0的缓冲液中进行自由界面电泳,其泳动方向为 ( )
A.向负极移动
B.向正极移动
C.不运动
D.同时向正极和负极移动
解析:选A。在pH=6.0的缓冲液中蛋白质带正电荷,其泳动方向为向负极移动。
4.有一混合蛋白质溶液,各种蛋白质的pH分别为4.5、5.2、6.6、7.2,电泳时欲使其中三种泳向正极,缓冲液的pH应该是( )
A.2.0 B.5. 0
C.6.0 D.7.0
解析:选D。在缓冲液的pH为7.0的溶液中,pH分别为4.5、5.2、6.6的蛋白质均带负电荷,在电泳时移向正极。
5.在血清蛋白的提取和分离过程中,所使用的染色液是( )
A.新制血清5 μL
B.质量浓度为0.4 g/mL的蔗糖溶液
C.质量分数为0.05%的考马斯亮蓝R250染色液
D.质量分数为0.1%的溴酚蓝指示剂
答案:C
6.(2012·长安一中高二检测)在用电泳法对蛋白质进行提取和分离时,常用的脱色液是( )
A.考马斯亮蓝R250染色液
B.醋酸溶液
C.蔗糖
D.甘油
答案:B
7.下列有关电泳现象的叙述,不正确的是( )
A.相同蛋白质的溶液,经过同一个电场电泳后,会在支持物凝胶上形成相同的带纹
B.不同蛋白质的混合溶液,经过同一个电场电泳后,在支持物凝胶上形成不同的带纹
C.每一种带纹可能就是一种蛋白质
D.每一种带纹一定不是一种蛋白质[Ks5u.com]
解析:选D。不同蛋白质的混合溶液,在经过同一个电场电泳后,会在凝胶上形成不同的带纹。不同的蛋白质可以在同一带纹中,但同一种蛋白质一定存在于同一带纹中。
8.如图表示对某蛋白质溶液进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果(相似于纸层析法分离色素),下列相关叙述不正确的是( )
[Ks5u.com]
A.蛋白质上某些基团解离后可使蛋白质带电,电场中带电的蛋白质分子(或多肽)会向着与其所带电荷相反的电极移动
B.在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中,蛋白质的迁移速度完全取决于其所带净电荷多少
C.在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中,蛋白质的迁移速度基本取决于其相对分子质量的大小
D.电泳结果表明溶液中蛋白质可能有两种,但也可能只有一种
解析:选B。蛋白质的氨基与羧基可发生解离,使其带正电或负电,在电场中发生迁移,则A项正确。SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳所加的SDS可完全掩盖蛋白质本身所带的电荷,其移动速度与本身所带的电荷无关,只由其相对分子质量的大小决定,则B项错误,C项正确。此电泳会使蛋白质水解成肽链,结果可能只有一种蛋白质(有两种肽链),也可能是两种蛋白质,则D项正确。
我们通常选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验,来提取和分离血清蛋白。请回答下列有关问题:
(1)实验前取新鲜血液,静置凝固后会析出淡黄色的液体——血清,其中含有的蛋白质有________、________等。
(2)血清蛋白提取和分离的活动程序为:__________________________________________
________________________________________________________________________,
在染色和脱色步骤中,所用试剂分别为_____________________________________________
_______________________、_________________________________________________。
答案:(1)两种球蛋白 凝集素[高考资源网KS5U.COM]
(2)点样→电泳→染色→脱色→制干胶板 质量分数为0.05%的考马斯亮蓝R250染色液 体积分数为7%的醋酸溶液
商品化植酸酶主要来自微生物,首先筛选出产酶的菌株,然后制备植酸酶,请根据下面的流程图回答问题:[高考资源网]
(1)Ⅰ中的主要成分有哪些?________。Ⅱ中包含哪些成分?________________。
(2)请写出一种纯化得到植酸酶的方法:________;其依据是________________________________________________________________________。
解析:本题考查了蛋白质粗提取和分离的方法。植酸酶是蛋白质,属于大分子有机物,含酶的发酵液经过透析后,能够除去小分子杂质,这样就能够得到植酸酶。对于粗提取的植酸酶可以用凝胶色谱法进行提纯,由于蛋白质带有电荷,亦可用电泳法进行纯化。
答案:(1)小分子杂质 含植酸酶等多种蛋白质[高考资源网KS5U.COM]
(2)电泳法 根据蛋白质之间电荷、分子大小等差异进行纯化
1.蛋白质分离提纯技术包括离心技术、层析技术和电泳技术等。电泳技术最为快捷灵敏,简便易行。[高考资源网]
2.蛋白质含有游离的氨基和羧基,是两性电解质,在一定pH条件下带有电荷。
3.蛋白质作为带电粒子,在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动。所带的电荷数越多,移动得越快;电荷数相同时,分子量越小,则移动越快。
4.电泳需要支持物,常用的是聚丙烯酰胺凝胶。
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