微生物培养基配制的原则有 目的要明确 、 营养要协调 、
PH要 适宜 、制好的培养基在分装前都应做 调PH 处理，要将已配制好的液体培养基制成固体培养基应添加 凝固剂如琼脂 ；培养基根据物理性质来划分为 固体 培养基、半固体培养基和 液体 培养基，在大规模的工业生产中一般选用 液体 培养基、要鉴定分解尿素的细菌用的是 固体 培养基；根据化学成分分为 天然 培养基和 合成 培养基：根据其用途又分为 选择 培养基和 鉴定 培养基。
2、培养基的营养一般都含有：水、 碳源 、 氮源 和 无机盐 ，还需要满足微生物生长对 适宜PH 、特殊营养物质以及 氧气 的需求。
3、获得纯净培养基的关键是 防止外来杂菌的干扰 ，消毒的方法有 煮沸消毒 和 化学试剂消毒 。一般不包括杀死芽孢和孢子；对活体材料都应选择 化学试剂消毒，常用的灭菌方法有 灼烧灭菌 、 干热灭菌 、 高压蒸汽灭菌 ，包括杀死芽孢和孢子。
4、芽孢于孢子的区别是 芽孢无繁殖能力，是一种抗逆环境的休眠体；孢子为无性生殖的细胞
5、纯化大肠杆菌的原理是：在培养基上将细菌稀释或分散成 单个细胞 ，使其生长成单个的菌落，其常用的方法有 平板划线法 、 稀释涂布平板法 ，要求无菌操作。
6、牛肉膏蛋白胨培养基制备的过程有:计算 称量溶化 灭菌 倒平板 。倒平板操作时需在 酒精灯火焰 附近操作，其原因是 防止空气中杂菌污染 ，平板冷凝后要将平板倒置的原因是 防止皿盖上的冷凝水落入培养基，造成污染 。
平板划线法操作时，要对接种环进行 灼烧 灭菌。a、第一次划线前灭菌的目的
是 避免接种环上的可能存在的微生物污染培养物 b、每次接种前都需要接种的目的是杀死残留菌种，保证 杀死上次接种残留的菌种 c、划线结束灭菌的目的是杀死残留菌种避免 残留的菌种污染环境和感染操作者 ，灼烧接种环后，要冷却才能伸入菌种中以免 杀死菌种 ，划线时最后区域不要与 第一区域 相连，最后结果是在 每个区域的末端 最容易获得纯净的菌种。
8、稀释涂布平板法操作的注意事项：a、每支试管及9mL的水、移液管均需要 灭菌 ，其常用的方法是 高压蒸汽灭菌 。操作时试管口和移液管应在 离火焰1-2cm处 ，b、吸取 1 mL含菌的液体注入一支试管中，注意使注入的液体与水充分混匀 c、涂布平板时，涂布器 用 70% 的酒精 消毒，取出时让多余酒精在烧杯中滴尽。
9、鉴定分解尿素细菌的方法：在以 尿素 为唯一氮源的培养基中注入酚红 ，若变 红 ，说明该细菌能分解尿素
10、培养基灭菌成功的检测方法（检测培养基是否被污染的方法）: 用空白培养基在适宜条件下培养一段时间观察是否有菌落的生成
11、微生物的计数方法主要是 涂布平板法 ，每克样品中的菌落数＝ C/V×m
在用稀释涂布平板法测定细菌数目时，每个稀释浓度至少要涂布 3 个平板并取其菌落
为 30-300 的平板进行计数。
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